OTIMIZAÇÃO DO MEIO DE CULTURA PARA PRODUÇÃO DE
-GALACTOSIDASE POR Kluyveromyces marxianus CCT 7082

Ana Paula Manera, Susana Juliano Kalil

Palavras chave: -galactosidase, Kluyveromyces, fermentação submersa, otimização.

A hidrólise da lactose pela enzima -galactosidase desempenha importante papel no processamento de produtos lácteos, obtendo alimentos com baixo teor de lactose, melhorando a digestibilidade e solubilidade de leites e derivados e prevenindo a cristalização deste açúcar em produtos. Em termos de interesse tecnológico a -galactosidase é produzida por leveduras do gênero Kluyveromyces por apresentar maior atividade enzimática em um meio com lactose, frente a outros microrganismos, e por ser considerado um microrganismo seguro para consumo humano. Este trabalho tem como objetivo otimizar o meio de cultura para produção da enzima -galactosidase obtida por espécies de Kluyveromyces em fermentação submersa. Primeiramente foi selecionado o melhor microrganismo produtor de -galactosidase, dentre cinco cepas de Kluyveromyces marxianus (CCT 7080, CCT 7081, CCT 7082, NCYC 587, e K. marxianus var. bulgaricus ATCC 16045) e duas cepas de Kluyveromyces lactis (NRRL Y 8279 e NRRL Y 1564), através de fermentação em frascos agitados usando meio a base de lactose. Foi feito o acompanhamento da atividade enzimática, dos açúcares redutores totais, da biomassa e do pH ao longo das fermentações. As melhores respostas para atividade enzimática foram obtidas ao empregar K. marxianus CCT 7082, com valores até 6 vezes superiores a segunda cepa maior produtora K. marxianus CCT 7081. A próxima etapa do trabalho será a utilização de técnicas de planejamento experimental e análise de superfície de resposta para otimização do meio de cultura. Um planejamento fatorial fracionário (24-1) será utilizado para determinar as variáveis independentes mais importantes dentre as estudadas: concentração de lactose, de extrato de levedura, de (NH4)2SO4, e o pH, selecionando as mais significativas para serem utilizadas em um planejamento fatorial completo. Como continuidade deste trabalho será otimizado um meio de cultura usando como substrato soro de leite, um subproduto dos laticínios, de modo a obter uma elevada produção de -galactosidase.