PEIXES (Danio rerio) GENETICAMENTE MODIFICADOS COMO BIOMARCADORES DE POLUIÇÃO AQUÁTICA PARA COBRE E METIL PARATION

Daniela Volcan Almeida, Jose Maria Monserrat e Luis Fernando Marins

Palavras-Chave: Peixe transgênico, EpRE, biomarcadores, Cobre, Metil paration

O primeiro nível de resposta de um organismo frente a uma situação de estresse por poluição é a ativação dos genes relacionados com o sistema de defesa antioxidante e/ou detoxificação celular. Para esta avaliação será desenvolvida uma linhagem de peixes geneticamente modificados a partir da tecnologia de transferência de genes por co-injeção. Esta linhagem se caracterizará por carregar uma construção genética produzida com elementos de resposta antioxidante (EpRE- Elemento de Resposta Eletrofílico) direcionando a expressão de um gene repórter (Luc- Luciferase) e uma construção marcadora constituída pelo promotor do gene da -actina de carpa (Cyprinus carpio) direcionando a expressão do gene da proteína verde fluorescente (GFP). Este tipo de modelo permitirá a análise em nível molecular, respostas induzidas por diferentes tipos de contaminantes, como metais (Cobre) e organofosforados (Metil Paration), visto que os elementos de resposta eletrofílicos estão comumente presentes nos promotores de genes de interesse toxicológico. Desta forma, pode-se inferir a resposta de vários genes simultaneamente a partir de um único modelo de expressão. Assim, este projeto visa estabelecer uma nova linha de pesquisa em ecotoxicologia que considere respostas em nível genético frente a diferentes poluentes aquáticos. Para atingir os objetivos propostos no presente projeto, será utilizado o peixe paulistinha, Danio rerio (Pisces, Ciprinidae) geneticamente modificado como modelo experimental . Especificamente será verificado o efeito do cobre sobre os níveis de expressão de um gene repórter associado a elementos de resposta presentes em promotores que dirigem a expressão de genes envolvidos com o sistema de defesa antioxidante. Assim as respostas genéticas obtidas serão comparadas aos parâmetros de qualidade ambiental estabelecidos pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA). O desenvolvimento de um modelo como este abre perspectivas para o estudo toxicológico em nível de expressão gênica, com aplicação direta na avaliação de qualidade ambiental.