DETERMINAÇÃO DA FASE INICIAL DA INFECÇÃO POR TOXOCARA CANIS

PAULA TELMO, CARLOS JANES SCAINI

A SíNDROME DA LARVA MIGRANS VISCERAL (LMV) é UMA ZOONOSE DISTRIBUíDA MUNDIALMENTE. O ENSAIO IMUNOEZIMáTICO (ELISA) ASSOCIADO AO ANTíGENO DE EXCREçãO E SECREçãO DE TOXOCARA CANIS (TES) é O MéTODO PADRãO PARA O DIAGNóSTICO DA LMV, PORéM ESTE NãO PERMITE A DISTINçãO DAS FASES INICIAL E CRôNICA DA INFECçãO. OBJETIVOS: DETERMINAR O PERFIL DA REATIVIDADE DE ANTICORPOS ANTI-T. CANIS DE CAMUNDONGOS SUíçO ALBINOS, FRENTE A FRAçõES DO ANTíGENO TES, EM DIFERENTES FASES DE INFECçãO EXPERIMENTAL. MATERIAL E MéTODOS: A PRIMEIRA ETAPA DESTE TRABALHO CONSTITUIU-SE NA PRODUçãO DO ANTíGENO TES. A SEGUIR, FOI FEITA A INOCULAçãO DE 1.200 OVOS EMBRIONADOS DE T. CANIS, POR VIA INTRAGáSTRICA, EM 10 CAMUNDONGOS SUíçO ALBINOS. APóS, FORAM FEITAS COLETAS DE SANGUE NO DIA ZERO (ANTES DA INOCULAçãO) E 10, 20, 30 E 60 DIAS APóS INFECçãO. PARA ANáLISE DOS SOROS, FOI EMPREGADO O MéTODO DE “WESTERN BLOTTING” (WB). INICIALMENTE, FOI REALIZADO O FRACIONAMENTO DAS PROTEíNAS DO ANTíGENO TES (200µG) DE ACORDO COM O PESO MOLECULAR, POR ELETROFORESE EM GEL DE POLIACRILAMIDA COM DODECIL SULFATO DE SóDIO, NA CONCENTRAçãO DE 12,5%. APóS A ELETROTRANSFERêNCIA DAS PROTEíNAS DO GEL PARA MEMBRANA DE PVDF, OS SOROS (DILUIçãO 1:32) FORAM SUBMETIDOS à MEMBRANA SENSIBILIZADA COM ANTíGENO, SENDO UTILIZADO O CONJUGADO ANTI-IGG DE CAMUNDONGO-PEROXIDASE (DILUIçãO DE 1:1000). RESULTADOS: A INFECçãO FOI CONFIRMADA ATRAVéS DA OBSERVAçãO DE LARVAS VIVAS DE T. CANIS NO TECIDO ENCEFáLICO DOS CAMUNDONGOS INFECTADOS. NOS SOROS DOS ANIMAIS COM 10 DIAS DE INFECçãO NãO FORAM IDENTIFICADAS AS BANDAS DE 60-65 KDA E DE 35-40KDA DO ANTíGENO TES, ENQUANTO NOS SOROS DOS CAMUNDONGOS COM 20 A 60 DIAS DE INFECçãO OCORREU O MESMO PERFIL DE RECONHECIMENTO DE BANDAS. CONCLUSãO: O NãO RECONHECIMENTO DESTAS BANDAS NO DéCIMO DIA DE INFECçãO PODE INDICAR A FASE INICIAL DA INFECçãO POR LARVAS DE T. CANIS.